讓專業人士教會你正確選用制備柱的4個重要知識點
瀏覽次數:1257發布日期:2021-06-21
使用制(zhi)備柱的目的是從混合物中得到純物質,即分離-純化-目標物,制備柱則是完成這一過程的工具。制備柱固定相種類和分析柱類似,制備柱的特點是:
1、柱(zhu)長短,內徑大
為(wei)了加快分離時(shi)間和提高分離效率,制(zhi)備色譜(pu)的進樣品量(liang)會(hui)很大,一(yi)般制(zhi)備柱(zhu)柱(zhu)長為(wei)50mm-250mm,而(er)內徑為(wei)10mm-50mm。
2、流速高
流(liu)動相(xiang)流(liu)速一般在10-20ml/min,可(ke)以提高產率,降低生(sheng)產成本。
如何(he)選擇一款合(he)適的制備柱?
第(di)一步(bu):選擇(ze)合(he)適的鍵合(he)相
目前市場需(xu)求來看,蛋白質、多肽等類的(de)物質分(fen)(fen)離純化十分(fen)(fen)普遍,其中以C18、C8、C4的(de)鍵合相(xiang)居多,月(yue)旭科技提供(gong)完整(zheng)的(de)鍵合相(xiang)產品線。
第二步(bu):選擇合(he)適的填料粒徑(jing)和孔徑(jing)
根據化合物的性質來(lai)選擇合適(shi)的填料(liao)粒(li)徑和孔徑
第三步:由(you)上樣(yang)量大小和樣(yang)品(pin)特性選擇合適的柱管(guan)
第四步:確定合適的流速和上樣量(liang)
制備柱的流速一般與(yu)直(zhi)徑的平(ping)方成正比,舉例:4.6mm分析柱流速為(wei)1ml/min,則10mm制備柱約為(wei)4.7ml/min。
制備柱采用(yong)與分(fen)析柱(zhu)(zhu)所(suo)用(yong)填料*相同,保(bao)證了分(fen)析規(gui)(gui)模(mo)(mo)和制備(bei)規(gui)(gui)模(mo)(mo)的(de)良(liang)好重(zhong)現(xian)性(xing),支持直(zhi)線(xian)放大;*的(de)裝(zhuang)柱(zhu)(zhu)技(ji)術和全不銹(xiu)鋼的(de)modular柱(zhu)(zhu)管,保(bao)證了柱(zhu)(zhu)床(chuang)的(de)穩定性(xing),經過測試10μm理(li)論(lun)塔板數>35000/m,5μm理(li)論(lun)塔板數>75000/m,峰(feng)的(de)對稱性(xing)值為0.95~1.20;還有上樣量高、支持線(xian)性(xing)放大、制備(bei)時間短(duan)、節約溶(rong)劑等(deng)特點。